牛轮状病毒VP4基因与LTB基因的融合表达及免疫原性研究

作者：南晓伟; 杨少华; 高运东; 王长法; 杨宏军; 刘晓; 何洪彬; 申之义; 仲跻峰

来源：西南农业学报, 2010, (01): 206-209.

DOI：10.16213/j.cnki.scjas.2010.01.063

• 牛轮状病毒
• 融合基因
• 原核表达
• 免疫原性 VP7-LTB
• Fusion gene
• Prokaryotic expression
• Bovine Rotavirus

PCR扩增轮状病毒VP4基因和大肠杆菌LTB基因编码区,将其克隆至pET32a载体上,构建pET32a-VP4-LTB质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),PCR、酶切鉴定后进一步测序,测序结果表明融合基因片段由2637 bp组成,为编码879个氨基酸残基的多肽。经IPTG诱导和SDS-PAGE检测发现表达产物分子量约为118.9 KD,以包涵体的形式存在。融合蛋白经镍离子螯合次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化后免疫小鼠,结果所产生的抗体效价高于单独VP4蛋白的免疫结果但差异不显著(P>0.5),但与对照组相比差异显著。表明所表达的融合蛋白具有较好的免疫原性,为研制牛轮状病毒亚单位疫苗奠...

• 出版日期2010
• 单位内蒙古农业大学; 山东省农业科学院