APP基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的稳定表达

作者：孙立伟; 姜锐

来源：中国老年学杂志, 2010, (23): 3504-3506.

• APP
• 真核表达载体
• 阿尔茨海默病 Amyloid beta-protein precursor
• Transfection
• Alzheimer disease

目的构建淀粉样前体蛋白(APP)基因真核表达载体,转染SH-SY5Y细胞,建立稳定转染细胞系。方法从质粒pcDNAs-APP中经PCR扩增出APP基因,利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1( )中,经酶切和测序鉴定后,脂质体转染法转染SH-SY5Y细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,通过印迹法(Western blot)检测APP的表达。结果 pcDNA3.1( )-APP重组体经PCR扩增后片段大小约为2 300 bp,与预期相同。测序结果与目的序列相同,重组体载体构建成功。Western印迹检测到SH-SY5Y细胞中APP的表达。结论成功构建pcDNA3.1...

• 出版日期2010
• 单位北华大学