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摘要
基于实验室应用高通量测序得到的奶山羊泌乳峰期和干奶期乳腺组织中小RNA结果的基础上,利用实时荧光定量PCR、基因克隆、重组腺病毒以及细胞培养等技术并结合生物信息学的方法,对miRNA-451的表达谱及其靶基因进行了预测与验证分析。miRNA-451在不同组织和不同泌乳时期乳腺组织中的表达量结果显示:miRNA-451在肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脂肪、卵巢组织表达量都很低,在4个泌乳时期(泌乳前期、泌乳峰期、泌乳末期和干奶期)的变化与泌乳曲线的变化有相似之处,同时在泌乳4个时期有逐渐降低趋势。本研究构建了携带奶山羊miRNA-451前体序列404bp的重组腺病毒载体。双荧光素酶报告检测系统检测结果表明,CAST基因为miRNA-451的靶基因。
