摘要

为了达到方便、快速检测赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的目的,利用羧基荧光素(FAM)与黑洞猝灭基团(BHQ1)之间的荧光共振能量转移(FRET)作用,使用纸基作为传感器基底,构建了简单、低成本、易于长期保存的纸基生物传感器用于检测食品中的赭曲霉毒素A。将可以特异性识别OTA的适配体(Apt-FAM)通过生物素和链霉亲和素之间的强相互作用连接在纸基上,当OTA存在时,OTA优先与Apt-FAM结合,与Apt-FAM互补的互补链(cDNA-BHQ1)不能通过碱基互补配对连接到纸基上,因而可获得较强的FAM荧光信号。当OTA不存在时,cDNA-BHQ1通过碱基互补配对与Apt-FAM结合,连接到纸基传感器表面,猝灭基团BHQ1靠近荧光基团FAM,通过FRET作用抑制荧光基团FAM的信号。在最佳检测条件下,传感器检测OTA的线性范围为10~2 000 ng/mL,线性方程为y=-15.858 46+65.631 38lg(COTA)(R2=0.995),最低检出限为1.2 ng/mL。该传感器能够成功用于检测米粉和绿豆饼样品中的OTA,其平均回收率分别为89.2%~111.0%和89.0%~103.0%。

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