大鼠lipocalin 11蛋白非保守半胱氨酸双点突变体样品制备及理化性质表征

作者：顾轶娜; 林东海

来源：药物生物技术, 2011, (03): 189-194.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.2011.03.001

• Lipocalin11蛋白
• 半胱氨酸突变
• 样品制备
• 配体结合 Lipocalin 11
• Cysteins mutations
• Sample preparation
• Ligand-binding

Lipocalin 11蛋白是新发现的一个lipocalin分泌型蛋白家族成员,与男性生殖密切相关。大鼠lipocalin 11(rLcn11)蛋白中4个半胱氨酸往往不能正确配对,为重组蛋白样品的制备带来困难。该研究通过序列比对和同源模建的方法获得rLcn11蛋白非保守半胱氨酸的位点,构建了rLcn11蛋白野生型与C59A/C156A突变体的表达系统和纯化方法。通过分子筛和圆二色谱分析rLcn11蛋白的聚集形态和结构特征,并用荧光滴定的方法研究了rLcn11蛋白与荧光探针ANS的结合能力。结果表明:(1)rLcn11蛋白非保守半胱氨酸残基的突变有利于减少蛋白的错误折叠和聚集,提高重组蛋白的产量...

• 出版日期2011
• 单位中国药科大学; 中国科学院上海药物研究所