阿魏酸对脊髓损伤大鼠微管相关蛋白轻链3、Beclin1、Bcl-2和Bax表达的影响

作者：俞雪锋; 蒋曦; 王国康; 张佳佳; 赵应征; 潘建春

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2016, 30(07): 714-722.

DOI：10.3867/j.issn.1000-3002.2016.07.002

• 阿魏酸
• 脊髓损伤
• 细胞凋亡
• 自噬

目的研究阿魏酸(FA)对脊髓损伤(SCI)模型大鼠的改善作用及其对微管相关蛋白轻链3(LC3)、人卷曲螺旋肌球蛋白样BCL-2结合蛋白/自噬基因1(Beclin1)、Bcl-2和Bax表达的影响。方法采用脊髓压迫损伤动物模型,即动脉钳夹闭脊髓2 min造成SCI。实验分为假手术组、模型6 h,1,3,7和14 d组、FA 100 mg·kg~(-1)(术后po,每天2次)给药6 h,1,3,7和14 d组。SCI后,进行BBB评分和斜板功能评分,随后处死大鼠,取脊髓进行HE染色,采用免疫组织染色法检测LC3和Beclin1蛋白,采用Western蛋白印迹法检测LC-3,Beclin1,Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与假手术组相比,模型6 h组BBB评分和斜板功能评分明显下降,分别由21分和70°下降为(0.5±0.5)分和(5.8±2.0)°;而FA给药7 d后BBB评分由模型7 d组的3.0±1.7上升为6.2±3.6(P<0.05),斜板功能评分则由(13.3±4.1)°上升为(26.7±8.7)°(P<0.01);HE染色发现,SCI损伤后出现组织水肿,结构呈空洞状;FA给药7~14 d,脊髓内部水肿及结构空洞得到改善。Western蛋白印迹法检测结果显示,SCI损伤后1 d,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin1表达增加(P<0.01),14 d组蛋白表达相比于1 d组下降(P<0.05);相对于自噬蛋白,抗凋亡蛋白Bcl-2表达增加,并且Bcl-2与致凋亡蛋白Bax的比值增加(P<0.05)。SCI损伤后给予FA,相比于SCI模型组,1 d组LC3和Beclin1表达增加(P<0.05);14 d组Bcl-2表达明显增加,其与Bax比值增加更为显著(P<0.05)。结论 SCI后可能存在着自噬先增强后减弱的发展过程,而抗凋亡作用可能存在着逐渐增强的趋势。FA对SCI具有潜在的治疗作用,其机制可能涉及对自噬和凋亡的影响。

• 出版日期2016
• 单位浙江大学; 温州医科大学; 浙江医药高等专科学校