大黄鱼β-actin抗体的制备与组织表达谱分析

作者：董乐; 姚丽梅; 戴聪杰; 张乐; 黄苹苹; 王建颖

来源：海洋科学, 2014, (12): 22-28.

• 大黄鱼(Larimichthys crocea)
• beta-肌动蛋白
• 原核表达
• 抗体
• 组织表达谱 Larimichthys crocea
• beta-actin
• prokaryotic expression
• antibody
• tissues expression

为探讨大黄鱼(Larimichthys crocea)β-actin基因(Lc Actb)作为内参基因进行相关研究的可行性,从转录和翻译水平研究其组织表达谱,作者以大黄鱼肝脏为材料,扩增Lc Actb的开放阅读框序列,并将其亚克隆至原核表达载体p ET32a(+)。酶切、测序结果表明,p ET32a-Lc Actb构建成功。将p ET32a-Lc Actb转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行优化表达,表达蛋白经纯化后进行Western blotting验证;原核表达结果表明,IPTG可诱导一个分子量约45 ku的特异蛋白,且主要以包涵体的形式存在,优化表达条件为:28℃、0.4mmol/L ...

• 出版日期2014
• 单位泉州师范学院