小环载体介导的siRNA稳定抑制乙肝病毒的复制和表达

作者：刘晓曼; 杨倬; 冯涛

来源：微生物学报, 2012, (02): 191-197.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2012.02.002

• 小环载体
• 乙肝病毒(hepatitisBvirus
• HBV)
• RNA干扰
• Huh-7细胞 minicircle DNA vector
• hepatitis B virus(HBV)
• siRNA
• Huh-7 cell

【目的】尝试构建表达小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的小环载体,并初步鉴定其对乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)复制及其基因表达的抑制作用。【方法】设计并合成靶向HBV S区的siRNA,将其克隆到小环载体pMC.BESPX-MCS2上,测序正确后将重组体pMC-H1-siHBS-U6转化入感受态E.coliZYCY10P3S2T,然后在培养基中加入L-阿拉伯糖,诱导其降解细菌骨架,获取只含有目的基因表达盒的小环RNA干扰载体pmc-H1-siHBS-U6。将小环RNA干扰载体与HBV真核表达质粒pHBV1.3共转染Huh-7细胞,分别...

• 出版日期2012
• 单位清华大学; 重庆医科大学