敲低miR-34c-5p抑制低氧诱导的大鼠骨髓间充质干细胞的凋亡

作者：董扬; 张芬; 李幸幸; 吴杰; 徐忠诚^*

来源：基础医学与临床, 2022, 42(11): 1690-1696.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2022.11.1690

• 敲低miR-34c-5p
• 骨髓间充质干细胞
• 低氧
• 细胞凋亡

目的 探讨敲低miR-34c-5p对提高骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)存活率的作用。方法 将大鼠BM-MSCs分为常氧组(normoxia组)、低氧组(hypoxia组)、常氧抑制剂阴性对照组(normoxia inhibitor NC组)、低氧抑制剂阴性对照组(hypoxia inhibitor NC组)、常氧微RNA(miR)抑制剂组(normoxia miR inhibitor组)和低氧miR抑制剂组(hypoxia inhibitor miR组);LipofectamineTM2000将miR-34c-5p inhibitor转染至BM-MSCs细胞；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA检测miR-34c-5p、IGF、HGF、bFGF和VEGF表达；流式细胞测量术和TUNEL检测细胞凋亡，Western blot检测cleaved caspase-3,-9,Bcl-2和Bax蛋白水平；生化试剂盒检测ATP/ADP。流式细胞测量术检测细胞摄取葡萄糖能力。结果 与hypoxia inhibitor NC组相比，敲低miR-34c-5p可明显抑制MSCs凋亡(P<0.01),显著降低cleaved caspase-3,-9和Bax蛋白表达，提高Bcl-2蛋白表达(P<0.01); IGF、HGF、bFGF和VEGF表达显著升高(P<0.05,P<0.01);ATP/ADP比率和细胞摄取葡萄糖的能力显著提高(P<0.05,P<0.01)。结论 敲低miR-34c-5p可抑制低氧诱导的大鼠BM-MSCs的凋亡。

• 出版日期2022
• 单位金华市人民医院