禽网状内皮组织增生症病毒env基因的原核表达及其多克隆抗体制备

作者：李凯; 高宏雷; 祁小乐; 高玉龙; 高立; 邓小芸; 王笑梅

来源：中国预防兽医学报, 2010, (10): 812-814.

• 禽网状内皮组织增生症病毒
• env基因
• 原核表达
• 纯化
• 多克隆抗体 reticuloendotheliosis virus
• env gene
• prokaryotic expression
• purification
• polyclonal antibody

为原核表达禽网状内皮组织增生症病毒(REV)env蛋白及制备抗env蛋白的高效价多克隆抗体,本研究以pMD18T-env(HLJR0901株)为模板,扩增得到REV的env全长基因,将其克隆于pET-32a(+)中。将阳性重组质粒pET-env转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达。利用亲和层析纯化重组蛋白,复性后免疫BALB/c小鼠,制备抗env多克隆血清。SDS-PAGE及western blot结果表明,env基因以融合蛋白形式获得正确表达,相对分子质量约为84ku,表达产物具有良好免疫原性;IFA结果显示,制备的抗env多克隆血清能与REV野毒株特异性反应;...

• 出版日期2010
• 单位兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所