大豆幼荚全长cDNA文库的构建及鉴定分析

作者：周莹; 王楠; 尹俊琦; 姚丹; 马建; 曲静; 王丕武

来源：大豆科学, 2013, (04): 455-458.

• 大豆
• 幼荚
• 全长cDNA文库
• SMART技术 Soybean
• Young pod
• Full-length cDNA library
• SMART technology

构建大豆幼荚全长cDNA文库,可为克隆与大豆产量相关基因,培育高产大豆新品种奠定基础。以吉农18大豆幼荚突变体为材料,提取大豆幼荚总RNA,反转录成单链cDNA,LD-PCR方法合成双链cDNA;PCR产物经蛋白酶K消化、Sfil酶切后,采用CHROM SPIN-400柱分级分离,回收500 bp以上的cDNA组分。以λTriplE×2载体连接并进行体外包装,构建吉农18大豆幼荚全长cDNA文库。经检测研究构建的大豆幼荚cDNA原始文库滴度达到1.5×106pfu.mL-1,重组率达92%。扩增的文库滴定达到2.6×108pfu.mL-1,重组cDNA片段长度在500 bp以上。结果显示构建的...

• 出版日期2013
• 单位吉林农业大学