摘要

目的:构建膜联蛋白A11(annexin A11,ANXA11)稳定下调的小鼠肝癌高淋巴转移力细胞株Hca-F。方法:合成2条针对ANXA11的发夹RNA(short-hairpin RNA,shRNA)序列shRNA1和shRNA2,连接到pGPU6/GFP/Neo质粒中,并转染到Hca-F细胞,获得了稳定转染的pGPU6/GFP/Neo-ANXA11-Hca-F细胞株。通过有限稀释法筛选单克隆细胞,并利用RT-PCR和蛋白质印迹法验证ANXA11的表达变化。结果:成功构建了pGPU6/GFP/Neo-ANXA11重组表达质粒,并筛选出单克隆细胞;RT-PCR及蛋白质印迹法检测结果表明,与空...

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