禽呼肠孤病毒σB基因在杆状病毒表达系统中的表达与鉴定

作者：王盛; 谢芝勋^*; 沈文康; 谢丽基; 范晴; 罗思思; 张艳芳; 曾婷婷; 黄娇玲; 张民秀; 谢志勤; 邓显文

来源：中国兽医科学, 2020, 50(04): 479-484.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0050

• 禽呼肠孤病毒
• σB基因
• 杆状病毒表达系统
• sf9细胞

本研究旨在通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达具有生物学活性的禽呼肠孤病毒σB蛋白。首先,根据NCBI中ARVσB基因序列,设计引物构建σB基因重组供体质粒pFast-σB。随后转化DH10bac感受态细胞,筛选获得重组穿梭质粒Bacmid-σB。通过脂质体介导法转化sf9细胞,获得重组杆状病毒rBac-σB。将重组病毒感染sf9细胞,表达重组蛋白。通过SDS-PAGE、Western-blot和间接免疫荧光(IFA)检测表明,ARVσB蛋白在sf9细胞中成功表达,分子量约为41 ku,并具有良好的生物学活性,为进一步研究ARVσB基因的功能及其基因工程亚单位疫苗的研究奠定了基础。

• 出版日期2020
• 单位广西壮族自治区兽医研究所