假密环菌Armillariella tabescens EJLY2098 β-甘露聚糖酶的克隆、表达及性质分析(英文)

作者：王艳凤; 王衡馨; 黄小葵; 刘大岭; 姚冬生

来源：生物工程学报, 2009, (06): 920-926.

• &beta
• -1
• 4-甘露聚糖酶
• Armillariella tabescens EJLY2098
• 酶学性质
• GHF5 &beta
• -mannanase
• Armillariella tabescens EJLY2098
• characterization
• GHF5

本研究利用RT-PCR和RACE技术从Armillariella tabescens EJLY2098(一种食用真菌)中克隆出了β-甘露聚糖酶的全长cDNA,构建到pPICZaA载体上,并在毕赤酵母GS115中表达了含His标签的β-甘露聚糖酶(re-atMAN47)。该酶的全长cDNA共1481bp,编码445个氨基酸,序列分析表明该序列除含有β-甘露聚糖酶结构域外,还含有CBD和GHF5的结构域,因此可被归为糖苷水解酶家族5的一个新成员。诱导培养72h时重组酶活可达到1.067U/mL,蛋白含量为440mg/L。重组酶的最适反应温度为60°C,在30°C～65°C比较稳定;酶促最适pH为5.5、4.5～7.0之间比较稳定。这是首次关于Armillariella. tabescens EJLY2098产β-甘露聚糖酶的报道,得到了一个有较好热稳定性、pH稳定性和生物安全性的糖苷水解酶,将在饲料、食品、药物生产等方面有广泛的应用。

• 出版日期2009
• 单位暨南大学