AKT靶向miRNA表达载体的构建及其对胃癌细胞增殖侵袭的影响

作者：熊建光; 李湘楚; 何小飞; 于红刚

来源：山东医药, 2011, (35): 3-5.

• AKT基因
• microRNA
• RNA干扰
• 增殖
• 侵袭 AKT gene
• miRNA
• RNA interference
• proliferation
• invasion

目的构建靶向AKT基因的miRNA真核表达载体,观察其转染胃癌BGC-823细胞后对胃癌细胞增殖及侵袭的影响。方法设计并合成两条针对AKT基因的特异性miRNA干扰序列,与载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR连接,转化大肠杆菌,纯化并鉴定后转染BGC-823细胞,实时定量PCR及Western blot技术鉴定重组体对AKT基因表达的干扰效果。使用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞的侵袭能力。结果针对AKT基因的miRNA干扰质粒构建成功,BGC-823细胞转染该质粒后AKT mRNA及AKT蛋白表达明显受抑制,细胞增殖和侵袭能力均显著下降(P均<0.05)。...

• 出版日期2011
• 单位武汉大学人民医院