过表达miR-1182抑制脑胶质瘤细胞恶性表型的机制研究

作者：翟志浩; 罗斌; 练晓文; 陈建良; 钟远强; 游恒星^*

来源：中华神经医学杂志, 2021, 20(10): 973-980.

• 神经胶质瘤
• miR-1182
• 恶性表型
• 细胞周期蛋白
• 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路
• 上皮-间充质转化通路

目的探讨微小RNA(miR)-1182在脑胶质瘤中的表达情况及其过表达对脑胶质瘤细胞恶性表型的调控作用及机制。方法 (1)从中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)官方网站中下载198例脑胶质瘤标本的miR-1182表达水平数据及患者的生存期信息, 比较不同病理类型、不同WHO分级脑胶质瘤组织间miR-1182表达水平的差异, 并采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-1182的表达水平与患者生存期的关系。(2)体外常规培养人脑胶质瘤细胞系A172、LN229、T98G、U87、U251及人正常星形胶质细胞系NHA, 采用实时定量PCR(qPCR)法检测各组细胞中miR-1182的表达水平。(3)将U87、U251细胞分别分为miR-1182转染组与阴性序列转染组, 分别转染miR-1182模拟物和miR-1182阴性序列, 转染48 h后采用5-乙炔基-2’’-去氧尿苷(EdU)染色检测2组细胞的增殖能力, 流式细胞仪检测2组细胞的凋亡水平, Transwell实验检测2组细胞的迁移能力, Western blotting实验检测2组细胞中周期蛋白(c-Myc、c-JUN、CCND1、P21)及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、上皮-间充质转化(EMT)通路相关蛋白[PI3K、磷酸化(p)-PI3K、Akt、p-Akt、N-钙黏蛋白、β-连环蛋白、波形蛋白]的表达水平。结果 (1)WHOⅢ、Ⅳ级脑胶质瘤组织中miR-1182的表达水平均明显低于WHOⅡ级, 差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-1182低表达脑胶质瘤患者的中位生存期[(701.00±11.14) d]明显短于miR-1182高表达患者[(1812.00±23.21) d], 差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与NHA细胞比较, A172、LN229、T98G、U87、U251细胞中miR-1182的表达水平均明显降低, 差异均有统计学意义(P<0.05), 其中U87、U251细胞降低最明显。(3)与阴性序列转染组比较, miR-1182转染组U87、U251细胞的增殖能力明显减弱, 细胞凋亡率明显升高, 穿膜细胞数明显减少, c-Myc、c-JUN、CCND1蛋白的表达水平明显降低, P21蛋白的表达水平明显升高, PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达水平明显降低, N-钙黏蛋白、β-连环蛋白、波形蛋白的表达水平明显降低, 差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-1182低表达脑胶质瘤患者的预后较差。miR-1182在脑胶质瘤细胞中呈低表达。过表达miR-1182可通过调控细胞周期蛋白及PI3K/Akt、EMT通路相关蛋白的表达来抑制脑胶质瘤细胞的恶性表型。

• 出版日期2021
• 单位中山大学附属第八医院