摘要

目的探讨S期激酶相关蛋白2(Skp2)/p27轴参与结直肠癌(CRC)发生发展的分子机制,并初步研究其对CRC细胞LS513增殖、迁移侵袭及裸鼠成瘤能力的影响。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Skp2和p27在CRC组织、癌旁组织以及人正常结肠上皮细胞CCD841CoN、不同CRC细胞株LS513、SW480、HT29和SW620中的表达。取生长密度达50%~60%的LS513癌细胞转染pSUPER-siRNA NC或pSUPER-siRNA Skp2,分别记为siRNA NC组和siRNA Skp2组,另取未转染LS513癌细胞(LS513组)。转染或培养24小时后,CCK-8法检测细胞增殖活性;Transwell小室法检测细胞迁移侵袭能力;裸鼠成瘤实验检测细胞在动物体内成瘤能力;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测细胞中Skp2、p27、p21、p57和CKS1蛋白表达水平。结果与癌旁组织、CCD841CoN细胞相比,CRC组织、LS513、SW480、HT29和SW620癌细胞中Skp2 mRNA和蛋白表达水平显著升高,p27 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与LS513组、siRNA NC组相比,siRNA Skp2组细胞Skp2、CKS1蛋白表达水平、细胞增殖、迁移、侵袭及动物体内成瘤能力显著降低(P<0.05),p27、p21、p57蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 Skp2/p27轴参与CRC发生发展,干扰Skp2可增高CRC细胞中p27等抑癌蛋白表达,降低CKS1蛋白表达,抑制CRC细胞生长及迁移侵袭。

  • 出版日期2021
  • 单位开滦总医院林西医院