摘要

目的:应用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立稳定表达si Pin1的鼻咽癌细胞株。方法:将对照组病毒液lv-3和实验组病毒液si Pin1感染CNE2细胞,通过嘌呤霉素和绿色荧光检测筛选si Pin1稳定细胞株,在荧光显微镜下观察细胞的荧光表达,通过定量PCR和Western blot鉴定si Pin1细胞Pin1 mRNA和蛋白的表达。结果:筛选si Pin1稳定表达细胞株嘌呤霉素筛选浓度为1μg/ml,病毒感染后超过90%细胞发出绿色荧光,实验组si Pin1与对照组lv-3相比,Pin1 mRNA表达水平下降,Western blotting检测Pin1蛋白表达明显减少。结论:成功构建Pi...