AKT1基因过表达骨髓间充质干细胞的建立

作者：余云生; 沈振亚; 郭世强; 虞桂平; 叶文学; 黄浩岳; 陈一欢; 华菲; 章传凯

来源：江苏医药, 2012, (21): 2504-2506.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2012.21.003

• 基因治疗
• 骨髓间充质干细胞
• AKT基因 Gene therapy
• Bone marrow stromal cells
• AKT gene

目的使用慢病毒系统建立AKT1基因过表达的稳转骨髓间充质干细胞。方法扩增AKT1cDNA基因,并构建AKT1-cDNA表达载体,再结合穿梭质粒pCDH1-AKT1转染人胚肾293T细胞进行扩增后,使用慢病毒转染系统进行基因重组,并以其为载体转染猪的骨髓间充质干细胞,观察其荧光表达,采用Western blot和RT-PCR分别检测AKT1蛋白和mRNA表达水平。结果双酶切鉴定和测序结果表明,所获取的cDNA为AKT1的蛋白质编码功能区基因。293T细胞和骨髓间充质干细胞的转染效率均达到90%以上。Western blot和RT-PCR结果表明,稳转细胞的AKT1蛋白和mRNA表达水平均明显高于...

• 出版日期2012
• 单位苏州大学附属第一医院