禽流感病毒NA基因在巴斯德毕赤酵母系统中的表达

作者：冉多良; 施建忠; 孟庆文

来源：中国兽医科技, 2004, (06): 52-55.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2004.06.014

• 禽流感病毒
• 巴斯德毕赤酵母
• NA基因
• 分泌表达 avian influenza virus (AIV)
• Pichia pastoris
• NA gene
• secreted expression

采用PCR扩增禽流感病毒 (AIV)NA基因 ,克隆入 pMD18 T载体中 ,再亚克隆入含有AOX1启动子和α分泌信号肽序列的巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPIC9k中 ,构建了重组转移载体 pPIC9kNA。经电穿孔转化酵母宿主菌GS115和筛选高拷贝重组转化子及筛选His+Mut+表型转化子后 ,摇瓶培养 ,10mL/L甲醇诱导表达后 ,经SDS PAGE、Western blotting、双向琼脂扩散试验、神经氨酸酶试验分析证明 ,获得了几株高效表达重组表达株 ,并且该重组NA蛋白具有免疫学活性。

• 出版日期2004
• 单位兽医生物技术国家重点实验室; 新疆农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所