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摘要
目的 建立一种高效、快速、准确地同步检测侵染三七Panax notoginseng的2种病毒——三七Y病毒（Panax notoginseng virus Y,Pn VY）和中国番茄黄化曲叶病毒（tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV）的双重PCR技术。方法 分别以单一感染Pn VY或TYLCCNV及复合侵染了这2种病毒的染病三七植株为样品，CTAB法提取叶片总核酸作为模板，根据Gen Bank上已登录的Pn VY和TYLCCNV这2种病毒核酸序列设计特异性检测引物。通过单一PCR技术明确染病三七样品Pn VY和TYLCCNV的发生情况，筛选出可用于一步法双重PCR检测Pn VY和TYLCCNV的引物组合及引物浓度，并对反应条件进行优化。对扩增产物进行克隆测序，验证一步法双重PCR检测的准确性和特异性。结果 建立的一步法双重PCR检测技术能同步有效地检测三七病样中的Pn VY和TYLCCNV，检测灵敏度高，最低检测限点为核酸原液的0.01稀释倍数，特异性强。结论 所建立的一步法双重PCR检测技术可以高效、快速、准确、特异地同步检测三七样品中的Pn VY、TYLCCNV 2种病毒。
- 出版日期2022
- 单位云南农业大学; 现代教育技术中心
