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摘要
目的：观察七龙天对博来霉素致小鼠肺纤维化的干预作用及可能的作用机制。方法：将36只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、七龙天低、中、高剂量组、吡非尼酮组。建立小鼠肺纤维化模型后，空白组和模型组以0.9%NaCl溶液灌胃，七龙天组和吡非尼酮组分别以七龙天和吡非尼酮灌胃。给药21 d后，采用HE染色和Masson染色检测小鼠肺组织形态和胶原沉积情况，碱水解法检测羟脯氨酸（HYP）含量，qRT-PCR法检测TGF-β、α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α、CCL2、FOSL1、MMP9、CXCL5、AREG mRNA表达水平，Western blot、免疫荧光双标法检测TGF-β、α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α、IL-17R、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达水平，并对空白组和模型组小鼠肺组织进行转录组测序。结果：(1)与空白组比较，模型组小鼠肺组织呈现炎症细胞浸润和肺泡间隙扩大现象，胶原沉积较多（P<0.01）；与模型组比较，发现七龙天各剂量组可抑制炎症细胞浸润和肺泡间隙扩大，且吡非尼酮组和七龙天各剂量组肺部胶原沉积明显减少（P<0.05,P<0.01）。(2)与空白组比较，模型组的HYP含量升高（P<0.01）；与模型组比较，吡非尼酮组、七龙天各剂量组的HYP含量均降低（P<0.05,P<0.01）。(3)与空白组比较，模型组COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β、TNF-α的蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.01）；与模型组比较，吡非尼酮组和七龙天各剂量组的COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β、TNF-α蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05,P<0.01）。(4)通过对空白组和模型组小鼠肺组织的转录组测序分析可知，差异基因显著富集于IL-17/p38MAPK信号通路。(5)与空白组比较，模型组CCL2、FOSL1、MMP9、CXCL5、AREG mRNA和IL-17R、p-p38MAPK蛋白表达水平升高（P<0.01）；与模型组比较，吡非尼酮组和七龙天各剂量组的CCL2、FOSL1、MMP9、CXCL5、AREG mRNA和IL-17R、p-p38MAPK蛋白表达水平降低（P<0.05,P<0.01）。同时，七龙天对上述mRNA和蛋白表达的影响呈剂量依赖性，其中高剂量的作用更有效。结论：七龙天可以通过下调炎症与胶原基因和蛋白的表达，减轻肺部炎症反应，降低肺部胶原过度沉积，发挥干预肺纤维化的作用，其作用机制可能为通过抑制IL-17/p38MAPK信号通路发挥作用。
