雷公藤牻牛儿基焦磷酸合酶基因TwGPPS克隆与表达分析

作者：屠李婵; 张逸风; 苏平; 胡添源; 童宇茹; 关红雨; 赵瑜君; 张夏楠; 袁媛; 高伟; 黄璐琦

来源：中国中药杂志, 2017, 42(02): 220-225.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20161222.042

• 雷公藤
• 牻牛儿基焦磷酸合酶
• 克隆
• 生物信息学分析
• 蛋白表达

根据雷公藤悬浮细胞转录组数据设计特异引物,采用cDNA末端快速扩增技术克隆雷公藤牻牛儿基焦磷酸合酶基因TwGPPS1,TwGPPS2全长cDNA,并进行生物信息学分析和蛋白表达研究。首次克隆得到TwGPPS1核苷酸的完整开放阅读框长度为1 278 bp,编码425个氨基酸蛋白,预测蛋白等电点为6.68,相对分子质量为47.189 kDa;TwGPPS2核苷酸的完整开放阅读框长度为1 269 bp,编码422个氨基酸蛋白,预测蛋白等电点为6.71,相对分子质量为46.774 kDa;进一步构建了原核重组表达载体pET-32a-TwGPPS1,pET-32a-TwGPPS2,并成功诱导出TwGPPS1,TwGPPS2重组蛋白,为深入研究此关键酶基因功能和雷公藤萜类生物合成途径奠定基础。

• 出版日期2017
• 单位医药学院; 中国中医科学院; 道地药材国家重点实验室; 首都医科大学