定点突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的改善

作者：蔡少丽; 邹有土; 黄建忠; 林琳

来源：应用与环境生物学报, 2013, (01): 43-47.

• 扩展青霉
• 脂肪酶
• 定点突变
• 毕赤酵母
• 热稳定性 Penicillium expansum
• lipase
• site-directed mutagenesis
• Pichia pastoris
• thermostability

利用重叠延伸PCR方法对扩展青霉脂肪酶基因进行体外定点突变,构建了K115R与随机突变体ep8双突变的重组质粒pAO815-ep8-K115R.将该质粒电转化到毕赤酵母GS115中进行异源表达,获得双突变体脂肪酶PEL-ep8-K115R-GS.与野生型脂肪酶PEL-GS和随机突变体脂肪酶PEL-ep8-GS进行比较,发现双突变体脂肪酶PEL-ep8-K115R-GS在40℃温浴30 min后残余酶活为89%,比野生型脂肪酶PEL-GS和随机突变体脂肪酶PEL-ep8-GS分别提高54%和27%;双突变体脂肪酶PEL-ep8-K115R-GS的Tm值为42.2℃,比野生型脂肪酶PEL-GS提高...

• 出版日期2013
• 单位福建师范大学