不同方法对苦瓜核糖体失活蛋白的PEG化学修饰后蛋白浓度测定的差异

作者：李丹; 肖雪; 钟春燕; 王颖; 何夏燕; 王复林; 金家贵; 孟尧

来源：成都医学院学报, 2016, 11(06): 689-692.

• PEG化学修饰
• 苦瓜籽
• 核糖体失活蛋白
• 蛋白浓度测定

目的探究PEG化学修饰对4种常用蛋白浓度测定方法的影响。方法采用福林-酚试剂法(Lowry法)、二喹啉甲酸法(BCA法)、考马斯亮蓝法(Bradford法)和紫外分光光度法(UV法)分别测定样品中α-苦瓜素和抗人类免疫缺陷病毒植物蛋白MAP30经PEG修饰前、后的蛋白含量;并用Lowry法和BCA法对低浓度游离PEG修饰前、后的样品蛋白含量进行测定。结果发现考马斯亮蓝不与样品发生颜色反应,PEG修饰后会使UV法测定值变大,Lowry法测定值略有变大,BCA法基本不受影响;低浓度的游离PEG对测定方法无影响,但高浓度的PEG会吸附Folin-酚,形成黄色絮状物。结论 PEG化学修饰对蛋白浓度测定方法影响最小的为BCA法,Lowry法最灵敏,Bradford法不适用;而PEG化学修饰会使UV法测定值增大20%30%,可作为快速测定时的校准参考。

• 出版日期2016
• 单位成都医学院