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摘要
【目的】筛选大豆RACK1基因的RNAi突变体,为研究RACK1基因在大豆生长发育过程的调控作用提供依据。【方法】采用RT-PCR克隆大豆叶片RACK1基因核心保守序列片段,以植物表达载体pCAMBIA1301为基本载体,构建抑制大豆RACKl基因表达的RNAi载体。通过农杆菌介导转入大豆子叶节,经潮霉素筛选转基因植株,利用PCR、Southern blot及RT-qPCR进行转基因植株检测。【结果】克隆获得大豆RACK1基因核心保守序列片段432 bp;将该基因片段连接到pCAMBIAl301表达载体内含子两侧,通过酶切分析,RNAi载体构建正确。通过农杆菌介导,将该载体转入大豆中黄13号,...
- 出版日期2014
- 单位黄淮学院
