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摘要
利用 PCR技术从中国梅山猪白细胞总 DNA中扩增出猪β干扰素基因 (MS- IFNβ)。将 PCR产物克隆至 p MD18-T载体 ,利用双脱氧末端终止法测定了全基因的核苷酸序列。序列分析表明 ,β干扰素基因全长 5 6 1bp,编码 186个氨基酸 ,与 Gen Bank中 S4 1178的序列同源性达 99% ,在 12 8、177位核苷酸处发生了点变异 ,由 G变为 A,T变为 C,但仅导致 4 3位氨基酸由 G变为 E。在此基础上 ,合成了 1对引物 ,通过 PCR方法将编码成熟蛋白基因亚克隆到 p GEX-KG表达载体 ,转化宿主菌 BL2 1 (DE3) ,经 IPTG诱导后 ,得到高效表达 ,所表达蛋白质的大小约为 4 70 0 0 ,占总蛋白的2 3%。表达产物主要为不溶性的包涵体 ,包涵体经提纯后 ,能够抑制口蹄疫病毒 (FMDV)增殖
- 出版日期2005-1-15
- 单位华中农业大学
