NF-κB受体激活因子配体在大肠杆菌中的表达、纯化及其活性

作者：杨忠东; 何成

来源：中国生物制品学杂志, 2011, (12): 1385-1390.

DOI：10.13200/j.cjb.2011.12.10.yangzhd.001

• NF-κB受体激活因子配体
• 大肠杆菌
• 原核细胞
• 基因表达
• 生物活性 Receptor activator of NF-κB ligand(RANKL)
• E.coli
• Prokaryotic cells
• Gene expression
• Biological activity

目的在大肠杆菌中表达并纯化NF-κB受体激活因子配体(Receptor activator of NF-κB ligand,RANKL),并检测其生物学活性。方法 PCR扩增RANKL基因,克隆至原核表达载体pET-28a( )中,构建重组表达质粒pET-28a-RANKL,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析目的蛋白的表达和表达形式。表达产物经镍离子柱亲和层析、阴离子交换层析及阳离子交换层析进行纯化,纯化产物经SDS-PAGE分析纯度,Western blot检测其反应原性,BCA试剂盒测定蛋白浓度,并经MTT法及RAW264.7细胞分化试验测定其生...

• 出版日期2011
• 单位上海生物制品研究所有限责任公司