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摘要
目的:探索安石榴甙（PUN）在机械力诱导成纤维细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法:不同浓度（0、2.5、5、10、25、50、100μmol/L）的PUN处理L929细胞不同时间（12、24、48小时）后,采用CCK8法检测细胞增殖活性;采用Western blot检测不同浓度PUN（0、2.5、5、10、25μmol/L）处理24小时后Nrf2蛋白表达;将L929细胞根据是否行PUN（10μmol/L,24小时）预处理和是否采用四点弯曲力学加载系统进行机械力干预（5333μstrain,1 Hz,4小时）分为4组:空白对照组、加力组、PUN组及PUN加力组,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;采用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及caspase3的表达;采用H2DCF-DA荧光探针检测各组细胞内活性氧簇（ROS）水平的变化。结果:PUN在浓度10μmol/L、作用时间24小时对细胞增殖活性及Nrf2蛋白表达的促进作用最显著;与对照组相比,加力组细胞凋亡率明显增加、ROS水平显著上升、Bax表达和Active-caspase3/caspase3比率明显增加（P<0.05）;与加力组相比,PUN加力组细胞凋亡率显著减少、ROS水平明显降低、Bcl2表达显著增加、Bax表达和Active-caspase3/caspase3比率降低（P<0.05）。结论:PUN可明显减少机械力诱导的成纤维细胞凋亡,其机制可能是通过上调抗氧化蛋白Nrf2的表达,从而抑制机械力诱导ROS水平上升所导致的氧化损伤。
- 出版日期2017
- 单位武汉大学人民医院
