敲除CCR2基因对肺气肿模型小鼠单核细胞型髓源性抑制细胞向肺脏迁移的实验研究

作者：杨静^*; 高巧营; 关鑫; 何思梦; 吴晓炀

来源：国际免疫学杂志, 2023, 46(05).

• 肺气肿
• CC类趋化因子受体2
• 单核细胞型髓源性抑制细胞

目的探讨CC类趋化因子受体2 ( C-C motif chemokine receptor 2, CCR2)对肺气肿小鼠模型中单核细胞型髓源性抑制性细胞(monocytic myeloid-derived suppressor cells, M-MDSC)向肺脏迁移的影响。方法将10只雄性野生型(wild type, WT)C57BL/6小鼠随机分为正常对照组和肺气肿模型组, 每组5只。分别应用H&E染色和马松(Masson)染色方法观察两组小鼠肺组织病理特征;流式细胞技术检测两组小鼠肺组织中M-MDSC比例以及M-MDSC表达CCR2水平。采集WT小鼠骨髓细胞, 体外刺激诱导生成髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs), 标记羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(5, 6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFSE)后分别过继转移给WT小鼠(WT组)和基因敲除肺气肿小鼠(CCR2-/-组), 每组各3只, 流式细胞术观察CFSE+ M-MDSC在两组受体鼠肺脏等组织的分布情况。结果 H&E染色结果显示肺气肿模型小鼠较对照组小鼠肺泡腔直径明显扩大, 肺泡壁破坏增加, 肺泡间隔断裂融合;Masson染色结果显示肺气肿模型小鼠肺组织中出现胶原纤维沉积。与对照组相比, 肺气肿模型组小鼠M-MDSC占CD11b+细胞百分比显著增加, M-MDSC表达CCR2水平显著增加, 差异具有统计学意义[(6.40±1.58)%比(12.96±3.79)% , (6424.56±2280.61)比(15660.02±945.95), t=3.575、7.481, P值均<0.05]。过继转移实验发现, 与WT组相比, CCR2-/-组小鼠脾脏、肠系膜淋巴结、肺脏、派式结、血液中CFSE+ M-MDSC的百分率显著降低, 差异具有统计学意义[% :(68.30±3.68)比(39.80±7.14), (47.17±7.98)比(21.53±4.82), (31.73±13.77)比(6.08±2.33), (42.87±4.38)比(0.01±0.00), (88.73±3.18)比(62.87±13.15), t=6.155、4.761、3.187、16.970、3.313, P值均<0.05]。WT组与CCR2-/-组小鼠骨髓中CFSE+ M-MDSC的百分比差异无统计学意义(P>0.05)。结论敲除CCR2基因能够有效抑制M-MDSC向肺气肿小鼠肺脏及肺外组织的聚集, 提示CCR2通路可能参与肺气肿的发生发展进程。

• 出版日期2023
• 单位天津市南开医院