铁皮石斛丙酮酸激酶基因的克隆与表达分析

作者：张琳; 蔡茜; 张大为; 张岗; 郭顺星

来源：中草药, 2014, (07): 990-995.

• 铁皮石斛
• 丙酮酸激酶
• 基因克隆
• 表达分析
• 生物信息学 Dendrobium officinale Kimura et Migo
• pyruvate kinase
• gene cloning
• expression analysis
• bioinformatics

目的克隆珍稀濒危药用植物铁皮石斛丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)基因(DoPK),并进行生物信息学分析以及检测基因在不同器官中的表达情况。方法采用RACE技术获得基因的全长cDNA;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特性;用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助r实时荧光(real-time quantitative)PCR(RT-qPCR)分析基因在不同器官中的表达情况。结果克隆获得DoPK(GenBank注册号KC178572)的cDNA全长1 895 bp,编码一条由511个氨基酸组成的多肽,相对...

• 出版日期2014
• 单位中国医学科学院北京协和医院; 陕西中医药大学; 中国医学科学院药用植物研究所