AngⅡ通过AP-1调控内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达

作者：冯治宽; 单志新; 林秋雄; 朱杰宁; 麦丽萍; 谭虹虹; 邓春玉; 邝素娟; 余细勇

来源：热带医学杂志, 2010, 10(02): 115-119.

• 双萤光素酶报告基因系统
• 巨噬细胞移动抑制因子
• AngⅡ
• 克隆,分子

目的明确介导AngⅡ调控人内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)表达的转录因子。方法构建长度依次递减的MIF基因5’调控区的荧光报告基因表达载体,并将其转化入人脐静脉内皮细胞EAhy926。利用双荧光基因报告系统检测AngⅡ诱导后MIF基因5’调控区不同区段的转录活性。通过突变转录活性高的MIF5’调控区序列,初步确定可能的转录因子结合序列。设计针对可能的转录因子的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建其表达载体,分别检测候选转录因子沉默的HEAY926中MIF的转录活性和表达水平。结果双荧光基因报告检测显示,AngⅡ调控MIF表达的高转录活性区段位于-507至-188之间。序列突变和荧光素酶活性分析显示,MIF基因5’调控区-350至-339间的AP-1结合序列决定了MIF基因的转录活性。AP-1沉默后的HEAY926中AngⅡ调控的MIF转录活性显著降低(P<0.05),MIFmRNA和蛋白的表达水平也显著降低(P<0.05)。结论AngⅡ通过转录因子AP-1调控内皮细胞中MIF的表达。

• 出版日期2010
• 单位广东省心血管病研究所; 广东省人民医院