基于16S rDNA测序技术探讨参苓白术散对溃疡性结肠炎大鼠肠道菌群的影响

作者：徐霞; 王玮玮; 涂钰; 张文彤; 李冰涛; 张启云; 刘红宁; 徐国良; 姜丽^*

来源：中国中西医结合杂志, 2023, 43(11): 1334-1342.

• 参苓白术散
• 16S rDNA
• 溃疡性结肠炎
• 肠道菌群
• 大鼠
• 中药复方

目的 探讨参苓白术散通过调节肠道微生物的组成改善溃疡性结肠炎（UC）的作用及其机制。方法 采用连续灌胃5%聚糖硫酸钠（DSS）制备UC大鼠模型，将造模成功的12只大鼠按随机数字表法分为模型组（n=6）、参苓白术散组（n=6），另设正常对照组（n=7）。正常对照组、模型组大鼠灌胃灭菌纯净水（2 mL/d），参苓白术散组灌胃去离子水超声溶解的参苓白术散，剂量为每千克大鼠1.89 g/d，药液浓度为0.125 g/mL，给药30天。观察大鼠的体重、疾病活动指数（DAI）变化，检测各组大鼠血清中的C反应蛋白（CRP）、血清降钙素（PCT）以及诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）水平，并通过16S rDNA技术探讨大鼠经参苓白术散干预后肠道微生物结构的变化。结果 与正常对照组比较，模型组体重逐渐下降（P<0.05）,iNOS水平亦下降（P<0.01）,CRP、PCT水平及DAI评分升高（P<0.01）；与模型组比较，参苓白术散组大鼠血清CRP、PCT水平下降（P<0.05,P<0.01）。Alpha多样性指数显示：与正常对照组比较，UC模型组Shannon、Chao指数升高（P<0.01,P<0.05）,Simpson指数降低（P<0.01）。与模型组比较，参苓白术散组Shannon、Ace指数均降低（P<0.05）。Beta多样性分析中主成分分析(PCA)、主坐标分析(PCoA)、非度量多维尺度分析（NMDS）的结果显示各组内样本相对聚集，各组间样本距离较远，通过Venn图发现了正常对照组、模型组、参苓白术散组中分别特有81、83、73个OTUs。肠道菌群结构分析结果显示：与正常组比较，模型组放线菌门相对丰度及乳酸杆菌降低（P<0.05），变形菌门、拟杆菌门相对丰度增加（P<0.05），脱硫弧菌属、瘤胃梭菌属-9、拟杆菌属升高（P<0.01）；与模型组比较，参苓白术散组厚壁菌门丰度增加（P<0.05），拟杆菌门、软壁菌门丰度减少（P<0.05）。物种差异分析结果显示，在门到属水平上，正常对照组中区别于其他组的特征性差异菌有21个，参苓白术散组中区别于其他组的特征性差异菌有10个。最后通过环境因子关联性分析发现CRP与乳酸菌属呈负相关，与拟杆菌属呈正相关，i NOS与瘤胃球菌属＿UCG-005呈显著正相关，与瘤胃梭菌属-9、脱硫弧菌属、毛螺旋菌＿NK4A214＿group呈负相关。结论 参苓白术散可引起肠道微生物结构的改变，通过升高有益菌的丰度，降低致病菌来减轻UC的炎症状态。

• 出版日期2023
• 单位江西省中药药理学重点实验室; 江西省中医病因生物学重点实验室; 井冈山大学附属医院; 江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心