地衣芽胞杆菌α-淀粉酶酸性pH稳定性提升突变体的生化特征

作者：罗丹; 靳晓; 牛丹丹; 谢银珠; 林娟; 叶秀云

来源：食品与发酵工业, 2017, 43(05): 19-24.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201705004

• 高温α-淀粉酶
• 天然突变体
• pH稳定性
• 酶学性质

地衣芽胞杆菌α-淀粉酶(Bacillus licheniformisα-amylase,BLA)的pH稳定性在提升发酵生产过程特别是后提取工段的操作稳定性,提高产品得率,弱化酶成品贮存条件和延长货架期等方面具有重要价值。该研究对1株能够合成更好pH稳定性BLA的地衣芽胞杆菌B186 1-1的BLA进行了分子克隆、序列分析及性质研究,与模式菌株ATCC14580来源的BLA氨基酸序列相比发现,有4个位点的差异,包括:N4K、R134L、E243D和S320A。进一步克隆表达与纯化了该菌株的BLA,重组酶在80℃、pH 6.07.5下显示最高活性;在pH 5.0下放置1 h,该酶保留80%以上酶活力,而来源于菌株ATCC14580的BLA在此相同条件下仅保留约10%酶活力;通过3D结构模拟分析显示BLA中的差异性碱基与其pH稳定性存在相关关系。

• 出版日期2017
• 单位福建福大百特科技发展有限公司; 福州大学