钙结合蛋白S100A7通过上皮－间质转化促进宫颈癌细胞侵袭迁移

作者：田甜; 华震; 孔琰; 王灵芝; 刘翔宇; 韩毅; 周学敏; 崔竹梅^*

来源：中华肿瘤杂志, 2023, 45(05).

• 宫颈肿瘤
• S100A7
• 转移
• 上皮－间质转化
• 外泌体

目的探讨S100A7通过细胞内外作用影响宫颈癌细胞迁移和侵袭的作用机制。方法收集2007年5月至2007年12月在青岛大学附属医院妇科行手术治疗的5例宫颈鳞状细胞癌(简称鳞癌)和3例腺癌组织标本, 采用免疫组化SP法检测其S100A7蛋白的表达。通过慢病毒包装系统构建过表达S100A7的宫颈癌细胞HeLa和C33A, 作为实验组, 采用免疫荧光实验观察过表达S100A7宫颈癌细胞的形态变化, Transwell实验检测S100A7对宫颈癌细胞迁移和侵袭的影响, 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测宫颈癌细胞上皮-间质转化标志分子E-cadherin、N-cadherin、vimentin和fibronectin mRNA的表达。收集宫颈癌细胞条件培养基, 采用Western blot法检测细胞外S100A7蛋白的表达。将收集的细胞条件培养基加入Transwell下层小室, 检测细胞外S100A7对宫颈癌细胞运动能力的影响。分离纯化C33A细胞培养上清的外泌体, 采用Western blot法检测S100A7、CD81和肿瘤易感基因101的表达。将外泌体和宫颈癌细胞共孵育进行Transwell实验, 检测实验组和对照组外泌体对宫颈癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 S100A7蛋白在宫颈鳞癌组织中呈阳性表达, 在宫颈腺癌组织中不表达。成功构建稳定过表达S100A7的HeLa和C33A细胞。实验组C33A细胞呈梭形间叶性细胞形态, 对照组细胞则趋向于多边形上皮样形态。实验组HeLa细胞Transwell迁移实验和侵袭实验的穿膜细胞数分别为(152.00±39.22)个和(115.38±34.57)个, 均高于各自对照组[(105.13±15.75)个和(79.50±13.68)个, 均P<0.05];实验组HeLa和C33A细胞中E-cadherin mRNA的表达均下降(均P<0.05);实验组HeLa细胞中N-cadherin和fibronectin mRNA的表达、实验组C33A细胞中fibronectin mRNA的表达均增高(均P<0.05)。Western blot检测结果显示, 实验组HeLa细胞的培养上清中检测到S100A7蛋白表达。加入实验组条件培养基的HeLa细胞迁移实验和侵袭实验穿膜细胞数分别为(192.60±24.41)个和(105.40±27.38)个, 明显高于对照组[(98.80±47.24)个和(84.50±13.51)个, 均P<0.05]。成功提取C33A细胞培养上清中的外泌体, S100A7表达阳性。与实验组细胞提取的外泌体共孵育的C33A细胞迁移实验和侵袭实验的穿膜细胞数分别为(251.00±49.82)个和(524.60±52.74)个, 明显高于对照组[(143.00±30.85)个和(389.00±63.23)个, 均P<0.05]。结论 S100A7介导宫颈癌细胞发生上皮-间质转化, 并可在外泌体中发挥作用, 促进宫颈癌细胞的迁移和侵袭。

• 出版日期2023
• 单位青岛大学附属医院; 青岛大学