口蹄疫病毒泛亚型O/CHINA/99株全长cDNA分子克隆构建和感染性鉴定

作者：吕建亮; 张永光; 王永录; 潘丽; 刘力宽; 方玉珍; 蒋守田; 张维德

来源：病毒学报, 2009, (01): 58-62.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001956

• 口蹄疫病毒
• 全长cDNA
• 反向遗传学 FMDV
• full-length cDNA
• reverse genetics

设计并合成了O型口蹄疫泛亚型代表毒株O/CHINA/99基因组9条引物,利用RT-PCR扩增各基因片段,酶切后连到pOK-12载体上,经酶切、PCR和序列测定表明,O/CHINA/99全基因组由8 200个核苷酸组成,构建的感染性cDNA与原毒株的序列同源性为99.1%;利用T7 RNA聚合酶系统进行体外转录,转录产物RNA用脂质体转入BHK-21细胞传代培养,可观察到典型的FMDV致细胞病变效应;拯救病毒接种2日龄乳鼠后,可出现典型的临床症状,并于16～48h内死亡。以上结果表明,O/CHINA/99株全长cDNA分子克隆构建成功,并从构建的全长cDNA拯救出了口蹄疫病毒。

• 出版日期2009
• 单位家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部