侵袭性大肠埃希菌IpaC的表达和纯化与检验学研究

作者：刘庆权; 荣阳; 刘晓华

来源：中国医药指南, 2018, 16(06): 19-20.

DOI：10.15912/j.cnki.gocm.2018.06.015

• 侵袭性大肠埃希菌
• 毒力蛋白(IpaC)
• 原核表达蛋白
• 纯化

目的研究分析侵袭性大肠埃希茵的发病机制,表达和纯化侵袭性大肠埃希茵毒力蛋白IpaC与临床意义。方法将含有ipaC基因的pET32a-ipaC表达质粒载体转化大肠杆菌BL21(λDE3),在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,对诱导后的表达产物进行SDS-PAGE鉴定,并采用QIAexpressionitsTM蛋白纯化系统纯化目的蛋白。结果诱导后的表达产物经SDS-PAGE发现有一相对分子量约为63 kD的条带,其含量约占总蛋白量的13%,对目的蛋白进行纯化后发现,以400 mmol/L咪唑洗脱液洗脱时效果最为理想,纯度可达90%以上。结论 pET32a-ipaC重组表达质粒转化大肠杆菌B121(λDE3),可稳定、高效地表达目的蛋白;QIAexpressionistTM蛋白纯化系统是一种简便、高效的纯化系统,可获得高纯度的目的蛋白。

• 出版日期2018
• 单位辽阳市中心医院