对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白基因在毕赤酵母中的表达

作者：彭小莉; 谢明星; 刘棠; 陈双雅; 王群力; 陈伟玲; 王景明; 张其清

来源：食品工业科技, 2012, (13): 67-70.

DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2012.13.007

• 传染性皮下及造血组织坏死病毒
• 衣壳蛋白
• 毕赤酵母
• 真核表达 infectious hypodermal & haematopoietic necrosis virus(IHHNV)
• coat protein
• Pichia Pastoris
• eukaryotic expression

对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒是"须向OIE申报的甲壳动物重要疾病"之一。将该病毒主要结构蛋白基因克隆至毕赤酵母穿梭表达质粒pPIC9K,构建重组表达载体(命名为pPIC9K-IV),限制性内切酶BglⅡ对其进行酶切线性化,采用电穿孔法转化到毕赤酵母GS115宿主菌。采用PCR方法分析和G418筛选来鉴定重组的毕赤酵母,诱导表达的产物分别进行ELISA分析或Western blot免疫印迹鉴定,分泌表达产物分子量大小为40ku左右,原核表达时制备的兔抗对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白的血清可与真核表达的目的蛋白发生特异性反应。

• 出版日期2012
• 单位厦门大学