hiTAIL-PCR技术鉴定转基因猪整合位点的研究

作者:李莉; 李小平; 任林柱; 陈立梅; 王铁东; 张英; 闫森; 欧阳红生; 逄大欣
来源:中国兽医学报, 2010, (09): 1235-1238.
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.09.001

摘要

采用高效热不对称交互式PCR(hiTAIL-PCR)的方法,取转基因克隆猪血液,提取基因组作为模板,扩增目的片段,将扩增获得的特异性产物,连接到PGEM-T载体上,送测序公司测序。测序结果与载体序列经比对后,获得侧翼序列。将获得的侧翼序列提交GenBank与猪的基因组数据库比对确定了在基因组上的位置。结果表明目标序列整合到猪的15号染色体的基因组克隆(nw_00188566P4)中。该方法可以有效、快捷的鉴定外源基因在基因组中的整合的具体位置,具有良好的应用前景。

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