大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在大肠杆菌中的表达及其特性研究

作者:葛俊伟; 姜艳平; 杨敏; 哈卓; 乔薪瑗; 唐丽杰; 李一经
来源:东北农业大学学报, 2010, (06): 109-112.
DOI:10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2010.06.021

摘要

将大肠杆菌不耐热性肠毒素B亚单位(LTB)基因eltb克隆到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21/DE3/plyss。采用SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明,在大肠杆菌中高效表达了LTB蛋白,其产量约为细菌总蛋白的20%,GM1-ELISA方法鉴定目的重组蛋白可与GM1结合,具有潜在的佐剂活性;由纯化的重组蛋白免疫小鼠制备的抗血清效价为1:16000,并且可以特异性识别天然毒素。结果表明,所表达的LTB有良好的抗原性和佐剂活性,制备的抗血清具有良好的免疫活性,为下一步以LTB作为佐剂的黏膜疫苗研究提供基础材料。

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