禽流感病毒同义NP蛋白的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

作者：田石; 邓国华; 单继艳; 施建忠; 张国权; 陈普成; 柳金雄; 文雪霞; 姜永萍; 陈化兰

来源：中国预防兽医学报, 2013, (06): 464-467.

• 禽流感病毒
• 同义NP蛋白
• ELISA
• 检测 avian influenza virus
• consensus NP protein
• detection

为建立通用型禽流感病毒(AIV)快速检测方法,本研究将合成的同义NP(ConsNP)基因克隆于pET30a中,利用大肠杆菌系统进行原核表达,以纯化重组ConsN P蛋白作为包被抗原,建立了检测AIVNP抗体的间接ConsNP-ELISA方法,并优化了反应条件。结果表明:抗原包被量为1μg/孔;封闭剂为5%脱脂乳;一抗血清稀释度为1∶200;H RP标记的兔抗鸡IgG(酶标二抗)稀释度为1∶20 000;阴阳性临界值为:O D490nm值>0.239。该间接ELISA方法与其他亚型A IV阳性血清均呈阳性反应,与新城疫病毒,马力克病病毒,禽传染性囊病病毒阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性和敏感...

• 出版日期2013
• 单位甘肃农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室; 农业部