白色念珠菌3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及表达

作者：赵珊梅; 袁雪岩; 石建峰; 李昂; 苗群爱

来源：北京口腔医学, 2013, (05): 257-260.

• 白色念珠菌
• 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)
• 原核表达
• SDS-PAGE
• Western Blotting Candida albicans
• Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
• Prokaryotic expression
• SDS-PAGE
• Western Blotting

目的构建白色念珠菌3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)的表达载体并使其在大肠杆菌中正确表达。方法提取基因组总RNA,PCR方法获得GAPDH基因,构建其原核表达质粒pET-32a(+)-GAPDH,转化大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导产生蛋白,用SDS-PAGE和Western Blotting检测GAPDH蛋白表达情况。结果构建的白色念珠菌GAPDH基因表达质粒经序列测定证实,与GenBank数据完全一致。双酶切鉴定证实,克隆基因正确插入pET-32a(+)载体。在1.0 mmol·L-1的IPTG浓度诱导下表达,可观察到相对分子量51kDa的蛋白,经SDSPAGE和Western Blo...

• 出版日期2013
• 单位西安交通大学口腔医院