Nr4a2过表达慢病毒载体的构建及鉴定

作者：王晓晓; 付文玉; 庄文欣; 王倩; 刘宗昱; 刘金城

来源：生物技术世界, 2014, (10): 84-85.

• Nr4a2
• 慢病毒
• 载体构建
• 过表达

目的:构建含Nr4a2基因的绿色荧光慢病毒载体,并检测其体外表达目的基因的水平。方法:设计Nr4a2基因的引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增,插入经AgeⅠ/AgeⅠ酶切的GV287慢病毒载体构建GV287-Nr4a2慢病毒质粒。PCR鉴定、测序验证后,将其与pHelper1.0载体、pHelper2.0载体共同转染293T细胞(人胚肾细胞),48小时后收集含慢病毒颗粒的细胞上清液,经浓缩并测定滴度后感染293T细胞,72h后观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的表达。结果:酶切及测序鉴定证实成功构建了重组慢病毒载体GV28...

• 出版日期2014
• 单位潍坊医学院