Slug基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

作者：钱江; 傅仲学; 文坤明; 陈旺盛

来源：免疫学杂志, 2012, (02): 147-151.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20120033

• RNA干扰
• Slug
• 慢病毒载体 RNA interference
• Slug
• Lentiviral vector

目的构建Slug基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体。方法针对人Slug基因的序列,设计出RNA干扰的靶序列,合成靶序列Oligo DNA,退火形成双链DNA,通过Age I和EcoR I酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生shRNA慢病毒载体,质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆并用插入鉴定引物进行PCR鉴定阳性克隆并测序,同时应用Real-time PCR和Western blot方法检测HCT116结肠癌细胞中Slug基因mRNA和蛋白的表达情况。结果 PCR鉴定与DNA测序证实合成的含Slug shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确。Western...

• 出版日期2012
• 单位重庆医科大学附属第一医院