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摘要
目的:探讨叶酸修饰的第五代聚酰胺-胺型树枝状聚合物(G5-PAMAM-D-fol)作为基因载体进行前列腺癌自杀基因治疗的可行性。方法:以GS-PAMAM-D-fol为基因载体将含有自杀基因HSV-TK的重组质粒pcDNA3-tk转染至前列腺癌细胞系PC-3和LNCaP,24h后以RT-PCR法检测HSV-TK基因在两种前列腺癌细胞系中的mRNA表达;再次转染后24h,对转染的两种细胞分别给予不同浓度的前体药物更昔洛韦(GCV),48h后采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞抑制率。结果:RT-PCR结果证明G5-PAMAM-D-fol可将重组质粒pcDNA3-tk转染2种前列腺癌细胞并转录HSV-TK基因。MTT实验反映出A组(G5-PAMAM-D-fol/pcDNA3-tk)对PC-3和LNCaP细胞有明显的杀伤作用,并且比B组(G5-PAMAM-D/pcDNA3-tk)的细胞抑制率更高。C组(G5-PAMAM-D-fol)和D组(GS-PAMAM-D)随着GCV浓度的增加细胞生长并未受到明显的抑制,而且前者并未表现出比后者更明显的细胞杀伤作用。结论:G5-PAMAM-D-fol能够在体外将自杀基因重组质粒成功转入前列腺癌细胞并表达HSV-TK基因,其靶向性强且细胞毒性低。
