牛FADD基因的克隆分析及其真核表达载体的构建

作者：杨润军; 张路培; 许尚忠; 李俊雅; 高雪

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2009, (02): 15-20+26.

• FADD基因
• pAcGFP-Nl载体
• 融合蛋白
• 重组质粒 FADD gene
• pAcGFP-Nl vector
• fusion protein
• recombinant plasmid

【目的】克隆牛FADD基因并构建真核表达载体,以探讨其在牛卵泡发育过程中的调控作用。【方法】采用RT-PCR技术,从牛卵巢组织总RNA中反转录FADD cDNA,对编码区核苷酸序列分析后,将其全长cDNA删除终止密码子,采用定向克隆技术连接克隆到含有水母绿色荧光蛋白(AcGFP)报告基因的真核表达载体pAcGFP-Nl中,用BglⅡ、EcoRⅠ双酶切、测序进行鉴定,并进行了牛FADD mRNA的组织表达谱分析。【结果】克隆的牛FADD基因编码区全长序列与NCBI公布的序列完全一致,核苷酸和氨基酸序列与猪的同源性最高,与鸡的同源性最低,仅为42.5%和44%;通过PCR方法在FADD阅读框两端引...

• 出版日期2009
• 单位西北农林科技大学; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所