解淀粉芽孢杆菌pyrR基因敲除载体的构建

作者：吴庆; 刘慧燕; 方海田; 何建国; 贺晓光; 王梦娇; 于丽男

来源：南方农业学报, 2015, (08): 1339-1344.

• 解淀粉芽孢杆菌
• pyrR基因
• 基因敲除
• 温敏型敲除载体
• 胞苷 B.amyloliquefaciens
• pyrR gene
• gene knock-out
• temperature sensitive knock-out vector
• cytidine

【目的】构建用于解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)pyr R基因敲除的温敏型敲除载体,为研究pyr R蛋白缺失对胞苷合成的影响奠定基础。【方法】设计并合成含有限制性内切酶酶切位点的引物,以解淀粉芽孢杆菌基因组DNA为模板,利用PCR分别扩增pyr R基因的上游同源序列和下游同源序列,再定向克隆至含卡那抗性基因的p KS1温敏型载体上,构建敲除载体p KS1-pyr R。【结果】经特异性引物对pyr R-S1/pyr R-A1和pyr R-S2/pyr R-A2扩增,获得解淀粉芽孢杆菌目的DNA片段pyr R-up和pyr R-down,大小约500 bp;目...

• 出版日期2015
• 单位宁夏大学