大肠杆菌菌蜕作为核酸疫苗载体的实验方法研究

作者：靳小攀; 檀英霞; 李素波; 王璇琳; 高红伟; 王颖丽; 季守平

来源：军事医学科学院院刊, 2010, (02): 171-174+186.

• 大肠杆菌
• 菌蜕
• 疫苗
• DNA
• RAW264.7
• pDSred-N1 Esherichia coli
• bacterial ghost
• vaccines
• DNA
• RAW264.7
• pDSred-N1

目的制备大肠杆菌DH5α菌蜕,并用其装载核酸片段以及质粒DNA,体外转染抗原递呈细胞,探讨其作为DNA疫苗载体的可能性。方法将构建有φX174噬菌体裂解蛋白的温控型表达质粒pHH43转化入大肠杆菌DH5α中,诱导细菌裂解制备大肠杆菌DH5α菌蜕,利用制备的DH5α菌蜕装载核酸片段,并摸索出较好的装载方法用于质粒DNA的装载,然后转染巨噬细胞RAW264.7,观察转染效果。结果成功制备了大肠杆菌DH5α菌蜕,细菌的裂解效率可达97.8%,对核酸片段和质粒DNA的装载效率分别达94.89%和91.98%,装载红色荧光蛋白质粒pDSred-N1的DH5α菌蜕转染巨噬细胞RAW264.7,红色荧光蛋白...

• 出版日期2010
• 单位中国人民解放军军事医学科学院