摘要

大豆遗传转化一直是植物转基因领域的难点之一,农杆菌介导的子叶节法是大豆遗传转化最常用的方法,靶细胞与农杆菌的互作是该方法的关键环节,而外植体的状态是影响靶细胞活力进而影响外植体对农杆菌敏感性的重要因素。本研究利用中黄10、Jack和水里站3个品种材料开展转化试验,根据子叶和下胚轴的颜色和形态变化将外植体划分为6种状态,并以GUS基因瞬时表达效率为指标,比较不同状态外植体靶细胞对农杆菌敏感性,旨在鉴定外植体的最佳制备时期。结果表明:随着萌发时间的增加,外植体状态变化与萌发时间和真叶长度呈正相关,其瞬时表达效率差异显著,且3个受体品种外植体最佳瞬时表达状态存在差异,Jack和中黄10品种的最佳时期为HG、HG+CG、CG这3种状态的外植体,水里站品种的最佳时期YL状态的外植体,研究结果为大豆遗传转化体系的标准化提供了理论依据。