抗EGFR/抗KDR双特异性单链抗体的构建及表达

作者：周雅琼; 张娟; 金海珍; 何远; 王彤; 王旻

来源：药学学报, 2012, (10): 1317-1322.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2012.10.016

• 表皮生长因子受体
• 血管内皮生长因子受体2
• 双特异性单链抗体
• 单链抗体
• 原核表达 EGFR
• VEGFR2
• scDb
• scFv
• prokaryotic expression

针对EGFR或VEGFR信号通路的相互作用导致的耐药性,为增强抗EGFR或抗VEGFR2抗体单独使用疗效不佳的癌症的治疗效果,本文利用重叠PCR将抗人EGFR胞外区单链抗体基因scFv-E10和抗人VEGFR2(KDR)的单链抗体基因scFv-AK404R融合在一起,得到抗EGFR/抗KDR双特异性单链抗体(bispecific single-chain diabody,scDb)基因,scDb的连接肽序列为15个氨基酸(G4S)3,在肽链的C端引入His标签及myc标签。将scDb基因连接入载体pHEN2,转化大肠杆菌HB2151并诱导表达,经镍柱纯化获得电泳纯scDb蛋白,产量约为570μ...

• 出版日期2012
• 单位中国药科大学; 天然药物活性物质与功能国家重点实验室